超微量分光光度計原理是我們從事實驗室儀器研究和應用的人員需要掌握的知識。分光光度計就是利用分光光度法對物質(zhì)進行定量定性分析的儀器。該儀器是實驗室、科研機構(gòu)、醫(yī)療、農(nóng)業(yè)、食品廠、飲用水廠等機構(gòu)*檢驗設(shè)備。已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器。數(shù)字分光光度計常用于核酸，蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。分光光度計基本原理是指采用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產(chǎn)生特定波長的光源，光源透過測試的樣品后，部分光源被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。單色光輻射穿過被測物質(zhì)溶液時，被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度（光路長度）成正比。
超微量分光光度計，就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。紫外分光光度計可以在紫外可見光區(qū)任意選擇不同波長的光。物質(zhì)的吸收光譜就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量，相應地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會相同，因此，每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量。
1、溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素：他們可以引起機械部件的銹蝕，使金屬鏡面的光潔度下降，引起儀器機械部分的誤差或性能下降；造成光學部件如光柵、反射鏡、聚焦鏡等的鋁膜銹蝕，產(chǎn)生光能不足、雜散光、噪聲等，甚至儀器停止工作，從而影響儀器壽命。維護保養(yǎng)時應定期加以校正。使用紫外分光光度計應具備四季恒濕的儀器室，配置恒溫設(shè)備，特別是地處南方地區(qū)的實驗室。
2、環(huán)境中的塵埃和腐蝕性氣體亦可以影響機械系統(tǒng)的靈活性、降低各種限位開關(guān)、按鍵、光電偶合器的可靠性，也是造成必須學部件鋁膜銹蝕的原因之一：因此，使用紫外分光光度計必須定期清潔，保障環(huán)境和儀器室內(nèi)衛(wèi)生條件，防塵。
3、比例雙光束紫外分光光度計使用一定周期后，內(nèi)部會積累一定量的塵埃，由維修工程師或在工程師指導下定期開啟儀器外罩對內(nèi)部進行除塵工作：同時，將各發(fā)熱元件的散熱器重新緊固，對光學盒的密封窗口進行清潔，必要時對光路進行校準，對機械部分進行清潔和必要的潤滑。zui后，恢復原狀，再進行一些必要的檢測、調(diào)校與記錄。分析儀器工作者要懂得儀器的日常維護和對主要技術(shù)指標的簡易測試方法，自己經(jīng)常對儀器進行維護和測試，以保證儀器工作在*狀態(tài)。
超微量分光光度計是精密儀器，正確安裝、使用及保養(yǎng)對保持儀器良好的性能和保證測試的準確度具有重要作用。為了保證測試結(jié)果的準確性及可靠性，新制造、使用中和修理后的分光光度計都應定期進行檢定。檢定不合格的儀器還要進行及時調(diào)整。除此之外，分光光度計的操作步驟都有啥？為了解決使用者的疑惑，更好的保護分光光度計與實驗結(jié)果的準確性，本次特別介紹分光光度計，供參考！
超微量分光光度計的檢驗小妙招
1.波長準確度的檢驗：
分光光度計在使用過程中，由于機械振動、溫度變化、燈絲變形、燈座松動或更換燈泡等原因，經(jīng)常會出現(xiàn)刻度盤上的讀數(shù)與實際通過溶液的波長不符合的現(xiàn)象，
因而導致儀器靈明度降低，影響測定結(jié)果的精度，需要進行檢驗。
檢驗波長準確度zui簡單的方法是用干涉濾光片或鐠釹濾光片測量儀器的吸收峰值， 如果測出的值與濾光片標準值之差超出規(guī)程規(guī)定， 則需要進行波長調(diào)節(jié)。
2.透射比正確度的檢驗：
用透射比標準值分別為10 %、20 %、30 %左右的光譜中性濾光片，可見光區(qū)分別在440、546、635nm波長處，以空氣為參比，分別測量各濾光片的透射比，紫外光區(qū)用重鉻酸鉀溶液分別在235、257、313、350nm波長處，以高氯酸溶液為參比，測量其透射比。
3.穩(wěn)定度的檢驗：
在零點不受光的條件下，用零點調(diào)節(jié)器將儀器調(diào)至零點，觀察3分鐘讀取透射比的變化，即為零點穩(wěn)定性。在儀器測量范圍兩端向中間靠10nm處，調(diào)節(jié)零點后，蓋上樣品室蓋（打開光門），使光電管受光，調(diào)節(jié)透射比為95%（數(shù)顯儀器調(diào)至）察3分鐘讀取透射比的變化，為光電流穩(wěn)定性。
4.光的檢驗：
雙光束分光光度計棱鏡式儀器在420nm處，光柵式儀器在360nm處，紫外分光計在220nm處分別用符合規(guī)定的截止濾光片，以空氣為參比，測量其透射比值，即為儀器在相應波長下的雜散輻射率。
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更新時間：2019-09-26
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